紫外可見分光光度法是根據(jù)物質(zhì)分子對波長在200~760nm 范圍內(nèi)的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。由于它具有靈敏度高、選擇性好、適用濃度范圍廣、準(zhǔn)確度高、操作簡便、快速、安全等特點(diǎn)。從這項(xiàng)技術(shù)誕生至今,廣大的科技工作者一直致力于對它的研究。近幾年來,紫外可見分光光度技術(shù)取得了巨大的發(fā)展。本文將從以下幾方面作詳細(xì)綜述。
多組分體系的測定進(jìn)展:在分光光度分析法中,對于吸收曲線嚴(yán)重重疊的多組分的測定,一般是將組分分離后逐個進(jìn)行測定。近年來因計(jì)算數(shù)學(xué)的發(fā)展及計(jì)算機(jī)應(yīng)用的普及而迅速發(fā)展起來的計(jì)算分光光度法,是一種不經(jīng)分離同時(shí)測定多組分體系的快速、有效的方法。
除了用計(jì)算分光光度法不經(jīng)分離同時(shí)測定多組分體系外,人們還在嘗試用計(jì)算機(jī)和紫外可見分光光度聯(lián)用來測定多組分體系。以Glenn的正交函數(shù)法為基礎(chǔ)提出的一種嶄新的數(shù)學(xué)
變化方法——褶合光譜法,它根據(jù)諧波分析原理,將光譜吸收曲線看作是多個數(shù)學(xué)分量加權(quán)而成的。該方法可以顯示吸收曲線的細(xì)微差異,減少混合體系中共存組分的數(shù)學(xué)相關(guān)性,在混合物定量方法中有明顯的優(yōu)勢。應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助褶合光譜法,不經(jīng)分離同時(shí)測定了抗敏Ⅰ號中富馬酸酮替芬和地塞米松磷酸鈉的含量。褶合光譜法還被用于分析超臨界流體萃取選擇性。但是,褶合光譜法作為一個軟件包,對紫外可見分光光度計(jì)主機(jī)的要求很高,最重要的是要求儀器的雜散光、光度噪聲很小。
另外,在實(shí)際的測定過程中,有時(shí)會遇到待測組分與干擾組分的吸收峰相互重疊,樣液中共存的膠體和懸浮物影響測定的情況。導(dǎo)數(shù)分光光度法的出現(xiàn)解決了這一難題。近幾年來,隨著電子技術(shù)的飛速發(fā)展,特別是計(jì)算機(jī)的廣泛應(yīng)用,導(dǎo)數(shù)分光光度法這一技術(shù)也得到了發(fā)展。導(dǎo)數(shù)分光光度法靈敏度高、分辨率好、抗干擾能力強(qiáng),能將普通吸收光譜中重疊帶、肩峰和極微弱的信息分辨顯示出來,達(dá)到消除干擾和測定痕量組分的目的。它還能消除樣品渾濁等背景干擾,從而大大簡化了測定步驟。此方法主要應(yīng)用于混合物中多組分的同時(shí)測定、微量及痕量組分的測定、異構(gòu)物的鑒別等。