紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是一類很重要的分析儀器,無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、 材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理 行業(yè),紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)都獲得了日益廣泛的應(yīng)用
一般地,紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測(cè)系統(tǒng)組成。 紫外可見(jiàn)分光光度的技術(shù)指標(biāo)主要有 11個(gè) ,即: 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、波長(zhǎng)重復(fù)性、光度準(zhǔn)確度、 光度重復(fù)性、雜散光、光譜帶寬、基線平直度、穩(wěn)定性、光度噪聲、線性、線性動(dòng)態(tài)范圍。其 中波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、波長(zhǎng)重復(fù)性、光度準(zhǔn)確度、光度重復(fù)性、雜散光是較重要的技術(shù)指標(biāo),是衡 量?jī)x器質(zhì)量好壞的主要依據(jù)。下面逐一加以探討
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及其檢定方法 所謂波長(zhǎng)準(zhǔn)確度(Wavelength Accuracy) ,是指波長(zhǎng)的實(shí)際測(cè)定值與理論值(真值)之 差。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是很重要的技術(shù)指標(biāo),特別是在對(duì)不同儀器的 測(cè)試結(jié)果進(jìn)行比較時(shí),波長(zhǎng)準(zhǔn)確度更顯得重要。例如,要比對(duì)兩臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì) 同一樣品的分析測(cè)試給果,如果儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度不好,就無(wú)法進(jìn)行比較或比較不出正確 的結(jié)果。因?yàn)閷?duì)同一物質(zhì),在不同波長(zhǎng)測(cè)試時(shí),由于不同波長(zhǎng)時(shí)摩爾吸光系數(shù)不同,就會(huì) 有不同的靈敏度,即使是同一樣品,測(cè)試的數(shù)據(jù)也會(huì)不相同。用一臺(tái)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 做定量分析時(shí),若儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度不好,也會(huì)因儀器的波長(zhǎng)誤差,而產(chǎn)生很大的分析誤 差。 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢定方法有多種,常用的幾種方法分述如下。
( 1)汞燈 低壓汞燈是使用最多的一種標(biāo)準(zhǔn)光源,它的能量 90%以上集中在 253. 65nm 這一根 譜線上。目前,國(guó)內(nèi)外的許多生產(chǎn)廠商,都直接在紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上用汞燈測(cè)試波長(zhǎng) 準(zhǔn)確度。具體作法是: 將儀器的光源拆下,用標(biāo)準(zhǔn)燈代替原光源,測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)光源燈的各條 特征譜線,測(cè)量值與理論值之差,就是波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。例如,使用汞燈測(cè)試,則設(shè)置波段范圍 為245~ 560nm,光譜帶寬為 2nm,測(cè)量方式設(shè)置為能量測(cè)量,樣品和參考均為空氣,進(jìn)行波 長(zhǎng)掃描。而后將汞燈的各特征波長(zhǎng)的測(cè)量值與其相應(yīng)的理論值相減,所得的數(shù)據(jù)之差即 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。一般應(yīng)重復(fù) 3 次,取 3 次平均值作為儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。表 1 為低壓石英 汞燈參考波長(zhǎng)表