光柵是紫外可見分光光度計的關(guān)鍵光學(xué)元件之一,它直接影響紫外可見分光光度計的質(zhì)量。根據(jù)多年研制和維修各類紫外可見分光光度計的實踐,我們認為紫外可見分光光度計對光柵除了有明確的基本參數(shù)的要求以外,對其質(zhì)量指標(biāo)也應(yīng)有嚴(yán)格的要求,歸納起來,最重要的大致有以下四個方面:
雜散光?。核^雜散光示值假輻射和所需要輻射之強度比。雜散光對紫外可見分光光度計的影響特別大,雜散光是紫外可見分光光度計的主要誤差來源,1% 的雜散光在樣品吸光度為2.0AU時會產(chǎn)生20%的測量誤差,光柵的雜散光是紫外可見分光光度計中雜散光的主要成分,紫外可見分光光度計具有0.1%的雜散光時,在1.5AU處就呈現(xiàn)可測量出的對現(xiàn)行關(guān)系的偏差;濃度較高時,靈敏度和測量精密度的損失增大,到3.0AU時,即使樣品濃度繼續(xù)增加而吸光度也不再隨之增加了。此外還給出了三種不同程度的雜散光對吸光度的影響和吸光度誤差值。所以要提高紫外可見分光光度計的質(zhì)量,減小測量誤差,嚴(yán)格控制光柵的雜散光是重要的環(huán)節(jié)之一。不過,應(yīng)該指出,目前國內(nèi)外對雜散光測試方法很不一致,往往給紫外可見分光光度計的設(shè)計者和使用者帶來很多麻煩,例如,同一塊光柵,用目前國際上常用的截止濾光法測出的雜散光大小和用衰減法測出的雜散光大小,相差幾個數(shù)量級,會使人誤認為用衰減法測量的光柵的雜散光小。其實不然,由于方法不同,兩者根本無法比較,所以,我們認為從紫外可見分光光度計的設(shè)計和使用者的角度來講,光柵制造者應(yīng)同一雜散光的測量方法,我們的時間表明,用截止濾光法來測試光柵的雜散光比較好,因為其實用型較強,它可以與光柵單色儀、紫外可見分光光度計整機的雜散光測試統(tǒng)一起來。至于雜散光測試點的位置,我們認為提出的測三點(波段范圍兩端加中間任意一點)更能符合紫外可見分光光度計的實際要求。
輸出能量曲線變化平緩:
所謂輸出能量平緩,是指光柵對各種波長的輸出能量差要盡量小,一塊1200Gr/mm的光柵,若工作波長為200-600nm,一般來講,應(yīng)希望靠近200nm和600nm附近的輸出能量與光耀波長附近的輸出能量之差越小越好。而對閃耀波長處的輸出能量不一定要求特別高。因此,從紫外可見分光光度計使用角度出發(fā),我們認為在一般情況下,寧愿犧牲閃耀波長處的輸出能量,而適當(dāng)提高波段兩端的輸出能量。即:希望光柵的輸出能量曲線變化平穩(wěn)。至于在某些特殊要求的情況下,只需要光柵光柵某一點或某一段的輸出能量,而不考慮兩端或整個波段的能量,可不必希望光柵輸出能量曲線平緩。