可見分光光度計作為一種理化分析儀器，廣泛應用于化工企業(yè)、金屬加工企業(yè)、醫(yī)院以及科研單位的化驗室，可在光譜區(qū)(200~1000)nm 內對樣品進行化學物質的定性定量分析。 文章通過理論和實踐相結合的多年工作，對影響可見分光光度計使用準確度的各種分析論證，確認有多種因數(shù)影響了可見分光光度計波長準確度，通過對這些因素的分析，提出了控制波長誤差的解決辦法，并在發(fā)現(xiàn)波長超差的情況下，如何解決提供一些方法供大家參考。

     分光光度分析法是以物質對光的選擇性吸收為基礎的分析方法。根據物質所吸收光的波長范圍不同，分光光度分析法又有紫外、可見及紅外分光光度法。此方法是一種古老、成熟的分析方法，因為準確度和靈敏度較高，相對誤差小，儀器結構簡單，操作簡便，因而得到了普及。鑒于本類儀器在國民經濟中的重要性，被列為中華人民共和國強制檢定的工作計量器具目錄。

分光光度分析法特點

靈敏度高

通常， 待測物質的含量 1～10－5％時， 能夠用分光光度 法準確測定。 所以它主要用于測定微量組分。

應用廣泛

幾乎所有的無機離子和許多有機化合物可以用分光光度法進行測定。 如土壤中的氮、磷以及植物灰、動物體液中各種微量元素的測定。

操作簡便、迅速、儀器設備不太復雜

若采用靈敏度高、選擇性好的有機顯色劑，并加入適當?shù)难诒蝿话悴唤涍^分離即可直接進行分光光度法測定、其方法的相對誤差通常為 5～10％，其準確度雖不及重量分析法和容量法，但對于微量組分的測定，結果還是滿意的。

儀器測量誤差和測量條件

儀器測量誤差

在分光光度分析法中，使用任何光度計進行測量時，都會產生一定的誤差。這些誤差可能來自光源的電壓不穩(wěn)定，光電元件靈敏度的變化和儀器刻度讀數(shù)不準確等。

測量條件選擇

除選擇適宜的顯色條件外，還應當選擇合適的測量條件。主要的測量條件包括入射光波長、吸光度范圍和空白溶液等。 下面將分別討論。

選擇入射光波長

入射光的波長對測定結果的靈敏度和準確度都有很大的影響。選擇時應先繪制有色溶液的光吸收曲線。 然后選用該溶液的最大吸收波長來進行測量。如果試液中某種組分在同樣的波長也有吸收，則對測定有干擾，這時 可選另一靈敏度稍 低但能避免干擾的入射光波長。

控制吸光度的范圍

由儀器測量誤差的討論中可知為了使測定結果獲得較高的準確度，應該控制溶液的吸光度在一定的范圍內，一般要求是 0.15～0.8?？刂莆舛确秶姆椒ㄊ歉淖儽壬蟮暮穸?，也可以改變溶液的濃度或試樣的質量。

選擇適當?shù)膮⒈热芤?

參比溶液又稱空白溶液。在光度分析法中，利用參比溶液調節(jié)儀器的吸光度零點、消除顯色溶液中其他有色物質的干擾，抵消比色皿壁及溶液對入射光的反射和吸收的影響等。

共存離子的影響及其消除

共存離子與顯色劑生成有色化合物，使測定結果偏高；共存離子與被測組分或顯色劑生成無色化合物或發(fā)生其它反應，降低了被測組分或顯色劑的濃度，使測定結果偏低。

共存離子本身具有顏色：

消除共存離子的干擾主要有以下幾種方法：

1）加入適當?shù)难诒蝿?，使干擾離子形成無色的化合物。 從而降低溶液中干擾離子的濃度，使干擾消除。

2）控制顯色條件，消除干擾。 一種顯色劑對不同金屬離子的顯色反應，所要求的酸度常不相同。 因此可以將溶液的酸度控制在適當?shù)姆秶鷥?，便顯色劑只與被測組分反應而不與干擾離子顯色。

3）改變干擾離子的價態(tài)。 有些干擾離子在某一價態(tài)時與顯色劑反應生成有色化合物，而在另一價態(tài)則無此種反應。 在這種情況下，利用氧化還原反應使干擾離子改變價態(tài)，以消除干擾。

4）控制測量條件，如入射光的波長、空白溶液等，以消除某些干擾離子的影響。

5）采用適當?shù)姆蛛x方法將干擾離子分離。